Scantox는 조직 표본 채취부터 실험 절차 및 결과가 모두 포함된 연구 보고서 제출에 이르는 전체 조직학 서비스를 제공합니다. 당사의 접근법은 고객의 특정 요구 사항에 따라 어떤 서비스든 맞춤화할 수 있는 일련의 절차적 구성 요소에 기반합니다. 고객은 당사의 워크플로우에서 시작점과 종점을 자유롭게 선택할 수 있습니다.
고객이 소유한 동물을 사용하거나, Scantox의 방대한 설치류 계통 모음을 이용할 수 있습니다. 또는 QPS 동물 시설로 외부 배송을 준비하십시오. 설치류 표본 이외에 일반적으로 인체 및 영장류 조직 또한 다룹니다. 당사는 뇌 조직과 척수 조직 채취에 특화되어 있으나 기타 관심 조직의 절제에도 이와 동등한 능력이 있습니다. 조직 표본당 얻을 수 있는 정보를 극대화하기 위해, Scantox는 동일한 동물의 부위에 대한 생화학적 분석을 제공합니다.
당사의 숙련되고 훈련받은 직원들이 신속한 사내 처리를 진행하며, 매우 신뢰할 수 있는 배송 업체와 협력하여 고객의 귀중한 표본이 안전하게 운반되도록 보장합니다.
대상 조직의 절제, 정확한 조직 블록 손질, 조직 표본의 고정과 포매에 있어 고도로 표준화된 기본 절차가 수립되어 있습니다. 그러나 요청 시 대안을 사용할 수 있습니다. 필요한 사항을 당사에 말씀해 주시면, 처리해 드리겠습니다. 당사는 RNase-free 작업 경험이 있습니다.
고정
- 표준: 4% 파라포름알데히드
- 대안: 글루타르알데히드, 아연, 피크린산
- 완충제: PBS, 카코딜산, 황화물
포매
- 표준: OCT 또는 파라핀(Sakura, Tissue-Tek TEC)
- 대안: 플라스틱
당사의 전문 기술에는 폭넓은 절편 제작 기술과 조직 채취 전략이 포함됩니다. 고객 프로젝트의 특정 요구 사항에 따라 표본을 처리합니다.
절편 제작
- 슬라이딩 마이크로톰(Leica, SM2000R)
- 크리오톰(Leica, CM1950S 및 CM3050S)
- 진동 블레이드 마이크로톰(Leica, VT1000S)
- 방향을 선택하고 절편 두께를 명시하십시오
채취
- 채취 계획을 명시하십시오
- 체계적인 균등 무작위 표본 추출을 이용할 수 있습니다.
(설명은 다음을 참고: https://www.stereology.info/sampling/) - 자유 부유 절편
- 절편을 슬라이드에 부착합니다.
- 필요에 따라 슬라이드를 선택합니다.
염색 기술 및 응용
당사는 형광 및 발색 면역염색과 일반 조직학적 염색, 특수 목적 염색을 정기적으로 수행하고 있습니다. 또한, 고객의 구체적인 요구에 따라 맞춤화된 염색 프로토콜을 수립하고 최적화할 수 있어 기쁘게 생각합니다.
당사의 전문 기술:
- 확립된 염색 프로토콜 수백 개
- 항체 검사 및 최적화
- 바이러스 감염 대상 검증
- 형질전환 모델에서 대상 검증
- 화합물 탐지
다중 채널 면역 형광법
- 4개 채널의 면역 형광법과 핵 DAPI 라벨링
- 마우스, 랫트, 인간 조직을 위한 수많은 검증된 항체 조합
일반 염색
- 헤마톡실린-에오신
- 크레실 바이올렛(Nissl)
- 룩솔 패스트 블루
- 기타
특수 염색
- 티오플라빈 S 또는 콩고 레드(아밀로이드 플라크, tau 엉킴)
- 골지-콕스 도은법
- 프러시안 블루(미세출혈)
다차원 이미지 획득
당사가 제공하는 것:
- 자동화되고 종합적인 다차원 이미지 획득
- 체계적인 정량화를 위한 모자이크(타일) 고해상도 이미지
- 최대 5개 채널의 형광 이미징(녹색, 빨간색, 적외선, 근적외선, 핵 염색 DAPI)
- 체계적인 균등 무작위 표본 추출을 이용할 수 있습니다.
(설명은 다음을 참고: https://www.stereology.info/sampling/)
적절한 이미징 제어
자가형광은 자주 간과되곤 하지만 중요한 문제입니다. 대부분의 조직은 일정 수준의 자가형광을 발하는데, 이것이 특정 염색으로 오인될 수 있습니다. 이 불특정 신호는 보통 나이와 신경 세포의 크기에 따라 증가합니다. 그러므로 인간 뇌 표본에서 흔하게 나타나는 골칫거리이기도 합니다.
이런 현상을 제어하기 위해, 당사는 이용 가능한 네 개의 형광 채널 중 하나가 “고유” 형광을 이미지에 담도록 할당합니다. 이 채널을 “라벨링된” 채널에서 제외해보면 대상 구조물에서 나오는 특정 신호를 밝힐 수 있게 됩니다.
예를 들어, 미세아교 세포(녹색 화살표)가 550nm 채널에서 Iba1 항체로 특정하게 라벨링되었습니다. 적혈구(흰색 화살촉) 또는 세포 내 리포푸신 과립(흰색 화살표)에서 유래된 강력한 신호는 488nm의 라벨링되지 않은 채널에서도 나타나기 때문에 불특정 자가형광으로 식별됩니다. 650nm에서 신경 세포체는 NeuN로 라벨링되었습니다.
자가형광 채널을 이용한 이미지 교정의 예시는 다음과 같습니다. (A) 원본 Iba1 이미지. (B) 자가형광 채널. (C) Iba1이 아닌 배경 신호를 제거하기 위해 B를 A에서 제외했을 때의 결과 이제 교정된 이미지를 특정 Iba1 신호를 정량화하는 데 사용할 수 있습니다.
당사는 정교한 매크로 기반 소프트웨어 솔루션을 사용하여 뇌의 형태와 병리의 서로 다른 특징을 자동으로 분석합니다. 예를 들어 세포체나 축삭 섬유의 수치상 밀도, 시냅스 밀도, 수상돌기 분지, 뇌 영역 또는 플라크의 면적과 부피가 있습니다. 당사는 기꺼이 새로운 정량화 방법을 개발하고, 사용된 방법을 평가하고(타당성 분석), 기존의 방법을 개선(측정 검증)합니다.
라벨링된 구조물의 식별 및 탐지
- 라벨링된 구조물의 탐지 시 다음 방법을 통해 정확성을 보장합니다.
- 가능한 한 자주 녹아웃 조직의 항체를 검증
- 적절한 이미징 제어
- 전체 연구에 걸친 파라미터 임계 값 설정 및 필터링을 결정하고 지속해서 사용
영역 분석 및 목표 특징
정기적으로 폭넓은 자동 생성 판독 값을 다음과 같이 제공합니다.
- 총 면역 반응성 영역
- 면역 반응성 입자의 형광 강도 총합 또는 평균
- 라벨링된 입자의 수, 크기, 농도, 형태
- 크기 배제 및 목표 구간화
- 부피 측정을 위한 관심 영역의 정확한 형태적 묘사
- 기타
통계 데이터 분석
- 당사 과학자 및 생물 통계학자팀이 비편향적이며 대표성을 가지는 전문적 통계 데이터 분석을 수행합니다.
- 측정치 및 결과에 대한 성실한 품질 확인
실험 및 결과 보고
- 연구가 끝나면 고객은 모든 실험 절차, 실험 결과의 정량 및 정성 평가, 종합적 통계 분석을 포함한 전체 연구 보고서를 받습니다.
- 필요 시 연구 기간 동안 지속적인 업데이트가 제공됩니다.
